Congelamento e scongelamento di una linea cellulare

 

Congelamento


Il congelamento di una linea cellulare viene utilizzato per conservare le cellule ad un certo stadio della loro vita. È una tecnica che può danneggiare le cellule o stressarle se non viene eseguita attentamente.
Per il congelamento viene usato un terreno apposito chiamato terreno completo per il congelamento di una linea cellulare con 50% v/v di FCS e 10% v/v di DMSO (dimetilsolfossido) costituito da:

  1. 1 mL              DMSO
  2. 5 mL              FCS
  3. 4 mL              terreno RPMI1640 completo al 10% FCS

Le cellule vengono poi portate gradualmente a -196°C in azoto liquido.

 

Scongelamento


Lo scongelamento della linea cellulare è una procedura molto delicata. Le cellule devono essere velocemente scongelate secondo una determinata procedura per evitare shock che potrebbero portarle alla morte.
Le ampolle da congelamento vengono messe in un bagno a 37°C, successivamente vengono trattate con nuovo terreno completo per ristabilire l’ambiente di crescita.

 

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Checchi Marta - Barbara Commisso